产品描述
本产品中包含反应缓冲液、BstL DNA聚合酶和耐热型反转录酶的RT-Enzymes Mix、冻干保护剂和荧光染料组分。其中反应缓冲液中含Mg2+,dNTP等扩增必须组分,使用时只需要将Buffer、反应酶、荧光染料、引物混合并加入模板即可;若添加冻干保护剂可进一步配置可冻干体系。
应用:适用于DNA、RNA等温扩增。运输与保存方法:干冰运输,-25~-15℃保存。避免反复冻融,产品有效期12月。
实验流程
1)将Buffer取出解冻,使用前充分涡旋混匀,并短暂离心收集液体至管底。
2)反应体系按下表配制
备注:
10×Primer Mix浓度:16μM FIP/BIP,
2μM F3/B3,4μM Loop F/B。核酸模板建议使用DEPC水溶解。
3)扩增反应:在荧光PCR仪(如ABI7500等)上设置如下程序。
注意事项
1)Buffer融化后可能会有白色沉淀,在室温下充分混匀即可澄清。
2)反应温度可根据引物情况在62℃-68℃间进行优化。
3)实验应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样等过程。为避免污染,建议在超净台中配制反应体系,在其他房间的通风橱中加入模板以免产生假阳性干扰。
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