### RNase检测试剂盒(荧光探针法)简介
RNase检测试剂盒(荧光探针法)是一种基于荧光共振能量转移(FRET)原理的高灵敏度试剂盒,用于快速检测样本中的RNase活性。
#### 检测原理
试剂盒利用荧光标记的RNA寡核苷酸作为底物。该底物一端连接有荧光基团(如FAM),另一端连接有淬灭基团(如TAMRA)。在完整的底物中,荧光基团与淬灭基团距离较近,荧光信号被淬灭。当样本中存在RNase时,RNA底物被降解,荧光基团与淬灭基团分离,荧光信号得以释放。荧光信号的强度与RNase的活性和浓度成正比。
#### 产品特点
1. **高灵敏度**:能够检测低至0.03 pg的RNase。
2. **快速检测**:整个检测过程仅需20-30分钟。
3. **适用范围广**:可检测多种RNase,如RNase A、RNase T1、S1核酸酶等。
4. **操作简便**:采用一步法检测,适合96孔板高通量操作。
5. **仪器适配性强**:可在酶标仪、qPCR仪和Qubit荧光仪等多种仪器上使用。
#### 应用场景
1. **实验环境检测**:用于检测实验室中试剂、耗材或环境的RNase污染。
2. **生物制品检测**:评估生物制品中RNase的残留情况。
3. **RNA相关实验**:在RNA提取、纯化和储存过程中,检测RNase污染。
#### 检测步骤
1. **试剂准备**:将反应缓冲液、荧光底物等试剂平衡至室温并稀释。
2. **样品准备**:将待测样品稀释至适当浓度。
3. **反应体系设置**:将样品、标准品和荧光底物加入96孔板中,混匀后在37°C孵育。
4. **荧光检测**:使用酶标仪或荧光仪读取激发波长490 nm、发射波长520 nm的荧光信号。
#### 注意事项
- 试剂盒中的荧光底物需避光保存。
- 检测时建议设置标准曲线,以定量分析RNase活性。
- 样品和标准品应在同一板中测定,以确保结果的准确性。
RNase检测试剂盒(荧光探针法)因其高灵敏度、快速检测和广泛的适用性,已成为分子生物学实验中检测RNase污染的重要工具。
RNase检测试剂盒基于荧光基团标记的RNA探针,当样本中不含RNase活性时,该探针稳定存在,不会产生荧光信号;当样本中含有RNase 活性时,探针被降解,产生逐渐增强的荧光信号;荧光信号增加的速率与酶的数量和活性成正相关。用荧光酶标仪在ex/em=535/575nm 波长下测定荧光信号增加倍数,判断样本是否被RNase污染。
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