N-糖分析试剂盒批发报价 长期供货
2025-12-29
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- 简介
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N-糖分析试剂盒是一类用于生物样品中N-连接寡糖（简称N-糖链）的释放、纯化、衍生化及定性定量检测的专用试剂组合，核心功能是实现对糖蛋白上N-糖基化修饰的系统分析，广泛应用于抗体药物、重组蛋白、疫苗等生物制品的研发与质量控制，同时也是基础生物学、临床医学中糖组学研究的关键工具。
一、核心应用目标
N-糖基化是蛋白质最常见的翻译后修饰之一，其糖链的结构（如分支、长度、糖型）直接影响蛋白质的生物活性、稳定性、免疫原性及靶向性，例如，单克隆抗体的N-糖链结构是评估其 与安全性的核心质量属性。N-糖分析试剂盒的最终目标，就是通过标准化的试剂与流程，精准解析样品中N-糖链的种类、相对含量、结构差异，为生物制品的质量评估或基础研究提供数据支撑。
二、基本组成与功能模块
不同技术路线的试剂盒组分略有差异，但均包含四大核心功能模块，各模块协同完成N-糖链的完整分析流程：
N-糖释放模块核心试剂为肽-N-糖苷酶 F（PNGase F），这是一种特异性糖苷酶，可识别并水解糖蛋白中天冬酰胺（Asn）残基上的N-糖链（识别序列为Asn-X-Ser/Thr，X为除脯氨酸外的氨基酸），使N-糖链从蛋白骨架上游离。配套试剂包括变性液（如SDS溶液），用于破坏蛋白的空间结构，让酶更易接触到糖链结合位点；还有缓冲液，用于维持酶解反应的适宜pH 与温度环境。
N-糖纯化模块酶解后样品中含有游离N-糖链、蛋白碎片、盐离子等杂质，需通过纯化步骤去除干扰。常见纯化材料为固相萃取柱（SPE柱），填料多为石墨化炭黑、氨基或C18，可通过疏水作用、氢键作用特异性吸附N-糖链，再用洗脱液（如乙腈 - 水溶液）将其洗脱，得到高纯度的N-糖链样品。
N-糖衍生化模块游离N-糖链本身无紫外或荧光信号，直接检测灵敏度极低，因此需进行衍生化标记。核心试剂为荧光标记试剂，如2-氨基苯甲酰胺（2-AB）、2-氨基苯甲酸（2-AA），这类试剂可与N-糖链的还原端醛基发生反应，生成具有强荧光信号的衍生物，大幅提升检测灵敏度。配套试剂包括还原剂（如氰基硼氢化钠）、缓冲液，用于促进标记反应高效进行。
检测与校准模块包含用于定性定量的标准品（如已知结构的标准N-糖链混合物），以及适配不同检测平台的配套试剂：
适配高效液相色谱（HPLC）/ 毛细管电泳（CE）的试剂盒，会配备流动相组分（如磷酸盐缓冲液、乙腈）；
适配质谱（MS）的试剂盒，会配备质谱基质（如α-氰基-4-羟基肉桂酸）与质量校准液。
三、适用检测平台与场景
主流检测平台
试剂盒需与特定检测仪器联用，常见组合包括：HPLC - 荧光检测（用于常规糖型分析与相对定量）、毛细管电泳（CE）（适用于高通量样品筛查）、质谱（MALDI-TOF MS、LC-MS/MS）（用于糖链的精准结构鉴定）。
典型应用场景
生物制药领域：抗体药物的N-糖链分型检测，判断是否存在高甘露糖型、岩藻糖基化等影响 的糖型；疫苗的糖基化修饰分析，评估疫苗的免疫原性。
基础研究领域：细胞分化、肿瘤发生发展过程中，蛋白质N-糖基化的变化规律研究。
临床医学领域：通过检测血清蛋白的N-糖链异常，为疾病诊断提供生物标志物。
四、核心特点
特异性强：仅针对N-糖链进行分析，不会干扰O-糖链等其他糖基化修饰。
灵敏度高：荧光衍生化后检测限可达pmol甚至fmol级，可分析微量样品（μg级糖蛋白）。
操作标准化：试剂预制、流程固定，无需复杂的自主试剂配制，降低操作误差，适合实验室常规检测与高通量分析。
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